Projet Bio'Occ en 1ère STL

SANTE BIOTHERAPIE BIOPRODUCTION :

GLIOBLASTOME ET DOSAGE DE PROTEINES PAR LA METHODE DE BIURET

Lors de la 5ème édition des "Journées Relais Exposciences" dédiée au projet Bio’occ Biothérapies et Bioproduction, Nous avons eu l’occasion d’échanger avec Florent Arnauduc actuellement technicien d'enseignement et recherche en cancérologie au CRCT (Equipe RADOPT : Optimisation De La Radiothérapie : Des Voies De Signalisation Moléculaires Aux Essais Cliniques https://www.crct-inserm.fr/equipes/) à Toulouse et ancien étudiant du BTS Biotechnologie à Decazeville.   https://decouverte.mon-ent-occitanie.fr/projets-biotechnologies/journee-relais-exposciences/

L’équipe de recherche dans laquelle Florent travaille s’intéresse au glioblastome, le cancer cérébral le plus fréquent chez l’adulte. Il est causé par la prolifération anormale de cellules du système nerveux. La chirurgie est souvent le traitement de choix combiné à d’autres thérapies : https://youtu.be/sPoq8iwNidY

« Le blocage du facteur de transcription TAZ1 (protéine nécessaire à l'initiation ou à la régulation de la transcription d'un gène) par SiRNA (les petits ARN interférents sont de petits ARN pouvant se lier spécifiquement à une séquence d'ARN messager et ainsi empêcher l'expression de gènes en clivant cet ARN) diminue le taux de la cytokine GDF15 (substance secrétée par les cellules du système immunitaire) dans les cellules souches de glioblastome. De plus, cette cytokine rend aussi les cellules souches de glioblastome radiorésistantes, donc le fait de la diminuer amène une radiosensibilisation. Sans GDF15, les rayons sensibilisent les cellules souches de glioblastome. Le fait de diminuer GDF15 entraîne une diminution de la rechute donc une augmentation de la survie »

https://www.gene-quantification.de/rnai.html

https://www.youtube.com/watch?v=z0vMgZFdy5c

Les élèves de 1ère STL on eu pour mission d’évaluer l’action des inhibiteurs spécifiques (SiRNA) sur l’expression de protéines dont la cytokine GDF15 dosée dans des échantillons. En effet, le fait de mieux comprendre et visualiser comment une tumeur va récidiver et résister ou non au traitement va permettre de mieux cibler la tumeur afin de mettre en place une thérapie personnalisée.

L'activité en image :

Réalisation de la gamme d'étalonnage avec la BSA et pipetage des échantillons traités ou non avec les siRNA

ajout du réactif de Gornall avec le distributeur automatique pour le dosage de Biuret en gérant les risques liés à la manipulation

gamme d'étalonnage et échantillon à doser qui se situe dans la gamme

Lecture des absorbances au spectrophotomètre à une longueur d'onde de 540 nm

exploitation graphique des résultat à l'aide du tableur et détermination de la la quantité de protéine dans les échantillon à l'aide de l'équation de la droite de régression

Vérification de  la compatibilité métrologique des valeurs obtenues et exprimer le résultat de mesure conformément aux règles de métrologie

Conclusion :

La concentration en masse de protéines, sans traitement est supérieure à la concentration en masse de protéines,  avec traitement, le traitement permet donc de diminuer l'expression de GDF15 ce qui devrait augmenter la radiosensibilité et diminuer la rechute tout en augmentant les chances de survie.

retour au projet Bio'Occ : https://decouverte.mon-ent-occitanie.fr/projets-biotechnologies/projet-bio-occ-78009.htm

contact : stephanie.mas@ac-toulouse.fr